特异性小干扰RNA对晚期糖基化终产物受体介导肝星状细胞激活和胶原生成的抑制作用

摘要

目的探讨特异性小分子干扰RNA对晚期糖基化终产物受体（RAGE）介导肝星状细胞（HSC）激活和胶原生成的影响。方法构建RAGE特异性siRNA表达载体,经脂质体转染入HSC-T6细胞,以空白和转染非特异性siRNA表达载体p GCsi-C为对照.分别用实时荧光定量PCR和Western印迹法检测各组HSC-T6细胞RAGE、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和Ⅰ型胶原基因及蛋白的表达。结果与空白对照组和pGCsi-C组相比,转染特异性siRNA表达载体pGCsi-R1的HSC-T6细胞RAGE mRNA和相对分子质量50×10~3、46×10~3的RAGE蛋白表达分别下调79.65%、78.04%(F= 26.005,P＜0.01,56.09%、54.93%（F=365.185,P＜0.01）和63.67%、59.67%（F=386.07.P＜0.01）.同时α-SMA mRNA和蛋白、Ⅰ型胶原mRNA和蛋白的表达也受到明显抑制,分别为空白对照绀和pGCsi-C组的57.53%、65.50%（F=20.913,P＜0.05）、58.18%、62.80%（F=56.592,P＜0.05）、71.16%、74.23%（F=18.091,P＜0.05）和71.91%、76.09%（F=17.299,P＜0.05）。结论RAGE特异性siRNA可在细胞内稳定表达,并能有效抑制HSC的激活和Ⅰ型胶原生成。