TBX18腺病毒使成鼠骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的研究

摘要

目的 研究TBX18腺病毒能否转染成鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),并诱导其向心肌样细胞分化.方法 实验于2015年5月—2016年10月在武汉大学心血管病研究所/心血管病湖北省重点实验室进行.全骨髓贴壁法分离培养BMSCs,采用流式细胞仪分析细胞纯度,随机数字表法分为实验组(TBX18组)、空白病毒对照组(GFP组)和空白对照组(B组),用TBX18或GFP重组腺病毒载体分别转染BMSCs,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测α-SMA基因的表达,蛋白质免疫印迹(Western blot)检测α-SMA和cTnI蛋白的表达.结果 通过全骨髓贴壁法可分离获得纯度较高的BMSCs(97％ ～99％).TBX18组的α-SMA mRNA表达(2.66±0.08)明显高于GFP组(1.49±0.09)和B组(1.00±0.00),差异均有统计学意义(t=16.743、36.813,P<0.01);TBX18组α-SMA蛋白的表达(0.66±0.00)明显高于GFP组(0.36±0.08)和B组(0.17±0.03),差异均有统计学意义(t=6.751、23.761,P<0.01);cTnI蛋白的表达(0.57±0.12)明显高于GFP组(0.32±0.04)和B组(0.09±0.00),差异均有统计学意义(t=3.298、6.660,P<0.01).结论 TBX18腺病毒能成功转入骨髓间充质干细胞,并在细胞内稳定表达;TBX18可诱导成鼠骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞.