高效毛细管振荡流液滴PCR

摘要

振荡流PCR结合了静态PCR与连续流动式PCB的优点,包括表面抑制效应降低、热循环数灵活设定以及便于实现实时和高通量检测.此外,由于使用毛细管作为PCR反应器,可以有效降低分析成本.聚四氟乙烯毛细管具有化学性质稳定、耐高温和透明性的特点,是理想的振荡流PCR反应载体.本实验搭建了一种毛细管振荡流PCR装置,利用聚四氟乙烯毛细管的疏水特性发展了振荡流液滴PCR方法.通过形成油包水液滴,不仅有效解决了反应中样品蒸发问题,同时也实现了对液滴运动的精确控制.通过优化液滴运动速度和反应组份可以在9 min内完成114 bp片段的扩增,其扩增产量与传统台式PCR仪相当.这种毛细管振荡流PCR系统具有快速、高效和低成本的特点和优势,有望以微全核酸分析系统的形式用于现场检测.