小标本二步酶消化法分离人头皮毛乳头细胞

摘要

目的 探索小标本高效快速分离培养头皮毛乳头细胞的方法.方法 2018年9月至2019年1月于陆军军医大学第一附属医院皮肤科收集3例头部色素痣、6例皮脂腺痣患者切除术后废弃的含毛皮肤标本,大小为0.5 cm×0.5 cm～0.5 cm×1 cm.剪下含有毛囊的皮下脂肪层,用眼科镊分选出其中的毛囊,0.6％分离酶Ⅱ消化30 min,然后采用0.2％胶原酶Ⅳ37℃消化30～60 min,离心获得毛乳头.对分离的毛乳头进行形态学观察,同时培养、传代、鉴定毛乳头细胞.结果 小标本二步酶消化法分离的头皮毛乳头镜下呈倒梨形,形态完整,部分可见残留真皮鞘,而一步酶消化法未分离出毛乳头.小标本二步酶消化法毛乳头分离率为60.8％±2.1％,72 h毛乳头细胞贴壁率为86.6％±3.9％,细胞迁出时间0.5～3.0d,实验总操作时间2.0～3.0h,实际操作时间1.0～1.5h.小标本二步酶消化法分离的头皮毛乳头细胞早期可呈凝集性生长,从第9代细胞开始呈非凝集性生长.结论 小标本二步酶消化法是一种简单、高效分离人头皮毛乳头细胞的方法.