UVB诱导皮肤细胞光损伤过程中线粒体DNA大片段缺失突变的研究

摘要

目的探讨UVB照射后,线粒体DNA（mtDNA）突变与皮肤细胞光损伤之间的关系。方法用UVB小剂量、多次照射人皮肤原代成纤维细胞（HSF）和成人原代角质形成细胞（HEKa）,诱导其相对活性下降,分别提取基因组DNA,以普通PCR检测mtDNA中的4977 bp缺失和3895 bp缺失突变的发生频率,并以荧光实时定量PCR法定量检测4977 bp缺失和3895 bp缺失的突变水平。结果①两种细胞株中4977 bp缺失和3895 bp缺失突变的发生频率和表达水平均随UVB照射剂量的增多、细胞活性水平下降而逐渐升高（Pearson相关分析,P＜0.05）。②3895 bp缺失突变的发生频率和突变水平最高分别达53.3%和（49.63±4.38）×10-5相对拷贝,比4977 bp缺失突变更能灵敏地反映UVB的累积辐射剂量。③UVB照射剂量达150 mJ/cm~2时,HSF即出现3895 bp缺失突变,4977 bp缺失突变也在UVB剂量达200 mJ/cm~2时被诱导出来,较HEKa更易被诱导出mtDNA突变。结论mtDNA突变的形成与累积与皮肤细胞接受的累积光照剂量密切相关,其中3895 bp缺失较4977 bp缺失更能反映细胞受到的光损伤程度,可作为一种皮肤细胞光损伤的生物学观察指标。