黄芩苷抑制长波紫外线诱导的人成纤维细胞氧化损伤和凋亡

摘要

目的探讨黄芩苷对长波紫外线（UVA）诱导的人二倍体成纤维细胞（HDF）氧化损伤和凋亡的抑制作用及其可能机制。方法 CCK-8法检测细胞活性,筛选最佳药物浓度。将成纤维细胞分成对照组、UVA照射组、UVA+6.25 mg/L黄芩苷组、UVA+12.5 mg/L黄芩苷组、UVA+25 mg/L黄芩苷组。利用荧光显微镜和流式细胞仪检测各组细胞中活性氧、超氧化物阴离子和一氧化氮含量的变化;流式细胞仪检测线粒体膜电位和细胞凋亡率的变化。Western印迹法检测凋亡相关蛋白caspase3含量。以上多组间比较均采用单因素方差分析。结果 UVA照射组的活性氧、超氧化物阴离子和一氧化氮含量分别为813.1±30.29、353.3±19.13、107.1±11.44,较对照组（442.5±29.45、223.4±10.67、42.17±2.59）明显上升,均P＜0.05);同时,UVA照射组较对照组线粒体去极化增强,凋亡率上升。与UVA组比较,各浓度黄芩苷作用组氧化产物包括活性氧、超氧化物阴离子及一氧化氮含量均有明显下降,线粒体去极化减弱,细胞凋亡率也显著下降,均P＜0.01。UVA组凋亡相关蛋白caspase3相对含量为1.2680±0.0091,明显高于对照组（0.3675±0.1115）,6.25、12.5和25 mg/L黄芩苷组（0.5588±0.1705、0.5365±0.1718、0.5454±0.2083）较UVA组有显著下调（均P＜0.01）。结论黄芩苷可以减轻UVA诱导的人成纤维细胞氧化损伤和细胞凋亡,其机制可能与清除活性基团、抑制线粒体膜去极化、阻止下游凋亡蛋白caspase3的激活和表达有关。