三种鸡形目雉科禽类卵黄抗体的纯化及二抗的制备

摘要

目的 纯化三种鸡形目雉科的禽类孔雀、鹌鹑、贵妃鸡的卵黄抗体IgY,并且免疫家兔制备抗血清.方法 采用了水稀释法,HiTrap IgY Purification HP 免疫亲和层析法和硫酸铵沉淀法纯化IgY.免疫家兔制备抗血清,免疫双扩散法测定效价.P rotein-A亲和纯化兔抗IgY血清IgG.结果 经亲和纯化和盐析纯化, 得到了孔雀、鹌鹑、贵妃鸡的卵黄抗体IgY,经SDS-PAGE检测为电泳纯, 孔雀、鹌鹑、贵妃鸡的卵黄抗体IgY的相对分子质量约为180×103.免疫后经Protein-A亲和纯化后获得了兔抗IgY的Ig G.结论 证实了孔雀、鹌鹑、贵妃鸡的卵黄抗体IgY的存在及其特性.雉科鸡形目禽类卵黄抗体的纯化方法相似,可以推广到鸡形目其它禽类的卵黄抗体的纯化中, 获得的抗血清可以进一步进行标记和今后抗原的检测.