抗传染性犬肝炎病毒单克隆抗体的制备及鉴定

摘要

目的 制备传染性犬肝炎病毒单克隆抗体.方法 将用纯化的犬腺病毒1型(CAV-1)免疫的BALB/c小鼠脾细胞与SP2/0细胞在聚乙二醇作用下融合,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫酶试验(IEA)筛选,以有限稀释法克隆3次,制备单克隆抗体,并对制备完成的单克隆抗体进行生物学鉴定.结果 成功得到2株能稳定分泌抗CAV-1的单克隆抗体杂交瘤细胞,命名为1E7、 2H3,经鉴定其亚型分别为IgG2b和IgG22a, 2株均为kappa链.腹水的ELISA效价可达107-108, IEA效价可达1:2560~1:5120.该单克隆抗体与CPV、 CDV、 FPV、 CCV病毒无交叉反应.结论成功制备了抗CAV-1单克隆抗体,为进一步建立相关诊断方法奠定了基础.