野生及笼养猕猴SV40 T抗原基因检测方法的建立

摘要

目的 建立猴外周血单核细胞SV40 DNA的PCR检测方法,对猕猴SV40 T抗原基因进行检测.方法 使用PCR方法对分别来自野外(云南宁蒗71只、景东60只)及笼养猕猴(64只)的SV40大T抗原基因进行检测,同时对扩增出的阳性结果进行测序.结果 在195份样本中,有4只来自野生猴样本扩增出SV40大T抗原基因(3.1%,4/131),1只来自笼养猴样本扩增出SV40大T抗原基因(1.6%,1/64).测序结果显示:猴血样本扩增片段序列与GenBank中的SV40大T抗原c-末端的基因序列片段有15个核苷酸不同(3.3%差异),与SV40-776标准株的序列基本一致,但SV40-776在nt3020处有一缺口.结论 云南野生及笼养猕猴猴群均能检出SV40 T抗原基因.因此建立SV40病毒的DNA检测技术,对用于科研及疫苗生产的实验猕猴的病毒学质量控制具有重要意义.