复方黄甘对糖尿病肾病小鼠氧化应激和Klotho mRNA及蛋白表达的影响

摘要

目的研究复方黄甘对糖尿病肾病小鼠氧化应激及肾组织Klotho表达的影响。方法按照体重将50只C57BL/6J雄鼠随机分为正常组、模型组、对照组、低高2个剂量实验组。除正常组外,其余各组均用高脂饲料和腹腔注射链脲佐菌素的方法建立糖尿病肾病模型。低高2个剂量实验组分别给予6,12g·kg^(-1)复方黄甘灌胃,对照组给予64 mg·kg^(-1)氯沙坦钾片灌胃,正常组和模型组给予等量0.9%Na Cl灌胃。5组小鼠连续给药4周。4周后,用全自动生化分析仪检测各组小鼠24 h尿蛋白、尿素氮(BUN)、血清肌酸酐(Scr)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC);用酶联免疫吸附实验法检测各组小鼠肾组织氧化应激指标水平;用实时荧光定量聚合酶链式反应和Western blot法检测各组小鼠肾组织Klotho mRNA及蛋白表达水平。结果治疗后,正常组、模型组、对照组、低高2个剂量实验组的24 h尿蛋白分别为(2.02±0.33),(8.36±2.10),(3.07±1.93),(4.29±1.79),(3.13±2.19)mg·d^(-1);BUN分别为(12.03±0.94),(27.93±5.73),(15.73±2.36),(15.49±1.57),(14.13±2.33)mmol·L^(-1);Scr分别为(13.72±0.97),(48.36±2.31),(24.93±1.83),(25.71±1.79),(21.09±2.39)μmol·L^(-1);TG分别为(1.43±0.33),(16.92±4.01),(6.24±1.83),(7.09±2.61),(6.37±2.33)mmol·L^(-1);TC分别为(2.03±0.42),(5.61±0.87),(3.97±0.53),(4.88±0.62),(4.31±0.28)mmol·L^(-1);丙二醛分别为(7.39±0.99),(16.20±2.03),(10.83±1.91),(10.07±1.87),(9.06±1.13)nmol·mg^(-1);超氧化物歧化酶水平分别为(120.31±9.58),(71.26±8.73),(100.23±10.55),(98.27±6.77),(109.73±11.18)U·mg^(-1);谷胱甘肽过氧化物酶水平分别为(103.27±7.48),(69.36±5.08),(92.73±10.72),(90.77±9.38),(96.58±8.23)μmol·g^(-1);Klotho mRNA表达分别为1.03±0.19,0.27±0.03,0.51±0.11,0.43±0.13,0.67±0.09;Klotho蛋白表达分别为1.58±0.24,0.45±0.03,0.83±0.11,1.25±0.08,1.39±0.12,正常组的上述指标与模型组、对照组、低、高剂量实验组比较差异均有统计学意义(均P<0.05),模型组的上述指标与低、高剂量实验组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论复方黄甘对糖尿病肾病小鼠具有肾保护作用,其机制可能与抑制氧化应激、升高Klotho基因表达有关。