免疫球蛋白A肾病大鼠模型建立的方法学研究

摘要

目的 分2个时间点评价不同剂量牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)灌胃联合尾静脉注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS),皮下注射四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)方法建立免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA)肾病大鼠模型的效果。方法 将SPF级健康雄性SD大鼠50只随机分为低剂量纯化水组(A组)、低剂量酸化水组(B组)、高剂量纯化水组(C组)、高剂量纯化水连续尾静脉组(D组)和空白组(E组),每组10只。A组给予400 mg·kg^(-1)纯化水配制BSA 500 mL,隔天灌胃1次,持续9周,蓖麻油0.3 mL+CCl_(4) 0.1 mL,每周皮下注射1次,共9周,于第6,8周尾静脉注射LPS 0.05 mg。B组给予400 mg·kg^(-1)酸化水配制BSA 500 mL,隔天灌胃1次,其余操作同A组。C、D 2组均给予600 mg·kg^(-1)纯化水配制BSA 500 mL,隔天灌胃1次,皮下操作同前,时间均延长至12周;分别于第8周和第10周对C组大鼠尾静脉注射LPS 0.05 mg。从第8周至第12周,每周对D组大鼠尾静脉注射LPS 0.05 mg。E组给予0.9%NaCl,操作同A组,持续12周。分别于第6,8,10和12周用考马斯亮蓝法测定大鼠24 h尿蛋白定量,用苏木精-伊红染色法观察大鼠病理组织,用免疫荧光法测定大鼠IgA沉积强度。结果 在第12周时,A、B、C、D、E组的24 h尿蛋白定量达到最高值,分别为(12.00±1.79),(12.71±3.40),(15.17±3.31),(13.43±2.23)和(4.05±0.82)mg·d^(-1),E组与其他4组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与第9周末相比,在第12周末时各模型组大鼠的肾病理病变更严重,IgA荧光沉积更显著,其中B、C组的IgA免疫荧光计数与E组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01),且C组的IgA免疫荧光强度较B组更强(P<0.05)。结论 以纯化水配制高剂量BSA(600 mg·kg^(-1))+LPS+CCl_(4),操作12周可建立肾组织病变更显著、更典型的IgA肾病大鼠模型。