特异性靶向葡萄糖转运-1抑制药(STF-31)通过影响人睾丸癌细胞I-10线粒体功能对介导细胞死亡的作用

摘要

目的从线粒体功能方面探究特异性靶向葡萄糖转运-1抑制药(STF-31)对人睾丸癌细胞I-10凋亡的影响。方法向I-10细胞分别加入低、中、高3个浓度(4,8,16μmol·L^(-1))的STF-31作为实验组,空白对照组加入等量培养基。用活性氧试剂盒检测细胞线粒体功能变化,四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖抑制率,碘化丙啶双染法检测细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测线B淋巴细胞白血病/淋巴瘤-2(Bcl-2)蛋白、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和自噬相关蛋白(LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ)相对表达水平。结果STF-31可随时间剂量依赖性的抑制I-10细胞增殖,低、中、高3个浓度实验组24,48,72 h的细胞IC50分别为21.3,8.01和4.13μmol·L^(-1)。空白对照组与低、中、高3个浓度实验组24 h细胞凋亡率分别为(4.93±0.54)%,(9.95±1.26)%,(26.70±3.11)%和(68.00±3.42)%;这4组的Bax蛋白相对表达量分别为0.10±0.04,0.32±0.06,0.53±0.11,0.71±0.04;这4组的Bcl-2蛋白相对表达量分别为0.42±0.03,0.25±0.24,0.12±0.14,0.05±0.18;这4组的cleaved caspase 3蛋白相对表达量分别为0.41±0.06,0.53±0.12,0.76±0.07,0.91±0.04;这4组的LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白相对表达量分别为0.81±0.04,2.30±0.11,2.70±0.09,3.60±0.07。上述指标:低、中、高3个浓度实验组与空白对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论STF-31对睾丸癌细胞I-10具有增殖抑制及诱导凋亡和增加自噬作用,其机制可能为STF-31影响I-10细胞线粒体功能。