RNA干扰技术沉默Stat3基因对胃癌细胞SGC7901生物学行为影响的实验研究

摘要

目的:构建Stat3-siRNA表达载体.探讨转染Stat3-siRNA表达栽体阻断人胃癌细胞系SGC7901的Stat3信号传导通路对人胃癌1细胞增殖和凋亡的影响.方法:利用RNAi技术,构建Stat3-siRNA表达栽体.稳定转染胃癌细胞系SGC7901.利用Real-time PCR、Western Blot、MTT、流式细胞技术等方法分别检测Stat3基因mRNA和蛋白表达厦细胞增殖和凋亡的变化情况.结果:成功构建Stat3-siRNA表达栽体,经测序验证无误.Westem Blot及Realtime PCR结果显示:Stat3基因的表达水平均下降,其中以SGC7901-siRNA3干扰效果最明显,差异具有显著性(P<0.05).MTT法结果显示:稳定转染SGC7901细胞后,细胞的增殖能力明显下降,与对照组相比差别显著(P<0.05).流式细胞技术显示:Stat3-siRNA3实验组较对照组出现了明显的细胞凋亡,在G1期前出现的亚二倍峰即为凋亡峰.结论:Stat3基因的RNAi重组体可以有效的抑制Stat3基因的表达.RNA干扰技术沉默Stat3基因能够抑制胃癌细胞的生长.促进其凋亡.