电喷雾串联质谱法检测干血斑中谷氨酰胺、谷氨酸及其临床初步应用

摘要

目的 建立一种采用电喷雾串联质谱法(ESI-MS/MS)检测干血斑样品中谷氨酰胺(Gln)和谷氨酸(Glu)含量的方法,评价其用于筛查新生儿鸟氨酸氨甲酰转移酶缺乏症和氨甲酰磷酸合成酶缺乏症的可行性.方法 收集2020年6—9月新生儿筛查足跟血干血斑样品,用非衍生化串联质谱检测试剂盒萃取样品,完成常规串联质谱检测项目后,将残余样品作为Gln和Glu的检测对象,复溶后选择正离子扫描模式进行分析测定,统计分析ESI-MS/MS检测Gln和Glu的正确度、精密度和稳定性,并评价其临床应用.结果 Gln在125～1250μmol/L浓度范围内回收率和正确度均良好,回收率为98.01％～107.24％,偏倚为0.56％～4.8％;Glu在250～1250μmol/L浓度范围内回收率良好,回收率为102.06％～113.65％,在250～1250μmol/L浓度范围内正确度良好,偏倚为0.09％～7.67％.Gln精密度良好,Glu精密度稍差.稳定性实验证实在样品复溶前后,Gln差异无统计学意义,但Glu差异有统计学意义.结合Gln和Glu检测结果,6份鸟氨酸氨甲酰转移酶缺乏症确诊患儿干血斑样品检出率为100％,并确定Gln的参考区间为<106.63μmol/L,Glu的参考区间为<188.24μmol/L.结论 成功建立了检测Gln和Glu的ESI-MS/MS法,该方法操作简单、成本低,不影响临床常规检测.