用欧蔓陀罗凝集素分离纯化人肝癌组织中强结合的γ-谷氨酰转移酶

摘要

目的 用欧蔓陀罗凝集素分离纯化人肝癌组织中强结合的γ-谷氨酰转移酶(γGT),为进一步制备其抗血清提供抗原,以期对肝癌早期诊断进行研究.方法 人肝癌组织经匀浆、溶解、盐析、透析、层析等步骤进行分离纯化;纯化过程中用IFCC推荐方法测定洗脱物的γGT催化活性,用紫外法监测蛋白出峰图谱,用Lowry法测定蛋白含量.结果 经过粗提、DEAE阴离子交换层析、凝胶过滤层析及凝集素亲和层析等纯化步骤得到电泳纯的γGT,其比活为10.56 U/mg蛋白,纯化倍数为84.9,得率为1.60%.结论 该分离纯化方法能够较好地分离纯化人肝癌组织中欧蔓陀罗凝集素强结合的γGT.