XTT/mPMS组合显色系统用于抗分枝杆菌药物筛选的性能评估

摘要

目的 评估一种用于抗分枝杆菌药物高通量筛选的XTT/mPMS组合显色系统.方法 评估XTT/mPMS系统的检测限、稳定性、细胞毒性、培养基组分干扰作用以及药物筛选试验的信噪比、Z’因子等性能指标,进行常用抗分枝杆菌药物最低抑菌浓度(MIC)测定,与刃天青显色法(resazurin microtitre assay,REMA)结果比较.结果 XTT/mPMS对分枝杆菌的检测下限为2.4×107 CFU/mL,检测上限不同菌种在1.8×10s ～7.5×108 CFU/mL之间.XTT/mPMS和7H9培养基37℃恒温共培养时至少在7d内保持相对稳定.XTT/mPMS能与7H9-S培养基组分的营养添加剂(OADC)发生非细胞还原反应；其工作浓度(XTT 0.2 mmol/L,mPMS 0.04 mmol/L)对分枝杆菌具有低细胞毒性；XTT/mPMS检测的Z’因子均大于0.8,信噪比较低；分枝杆菌7H9-S液体培养MIC检测5～7d(快生菌36 ～48 h)即可获得结果；MIC结果除M.tuberculosis的乙胺丁醇(EMB)有差异外基本与REMA法一致.结论 XTT/mPMS组合显色系统反应快速、稳定、低毒,适合于抗分枝杆菌药物高通量快速筛选.