未脱钙耳蜗组织树脂包埋与切片方法

摘要

耳蜗是一螺旋形骨管，与外壁的螺旋韧带相连，含有弹性纤维基膜、蜗轴的骨螺旋板等骨质结构。传统的制样方法是对耳蜗组织进行逐级脱钙，但脱钙的样品制备操作费时，难度较大，脱钙后组织成分有部分丢失，超微结构受到不同程度的损伤，尤其会导致膜性结构病理假象，给耳蜗样品观察带来困难。一些学者对未脱钙骨的制作技术进行改进，但对未脱钙耳蜗电镜技术探讨较少。本文在传统透射电镜样品制备基础上进行改进，省去脱钙操作步骤，采用未脱钙方法，以多聚甲醛与戊二醛的混合液灌注固定大鼠，增强固定液在耳蜗的渗透力，保证良好固定；用环氧树脂Epon混合包埋剂梯度浸透包埋、钻石刀连续大切片方法，取得较为满意的效果，现介绍如下。