大鼠脑缺血后水通道蛋白-4的表达与脑梗死异常代谢物相关性分析

摘要

目的研究大鼠脑缺血后水通道蛋白-4(AQP4)的表达及其与脑梗死异常代谢物的相关性.方法取成年Wistar大鼠48只,随机分为对照组、假手术组(各8只)和脑缺血组(32只),其中脑缺血组又按缺血时间分为脑缺血6h、1d、3 d和7d4个亚组,每组8只.对脑缺血组大鼠采用右侧颈内动脉线栓法栓塞右侧大脑中动脉起始部,对照组大鼠麻醉后不做任何处理,假手术组大鼠栓塞线仅插入颈内动脉.各组大鼠均于术后6 h、1 d、3 d和7 d做磁共振质子波谱(1H MRS)检查;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot分析AQP4的表达.结果脑缺血组缺血6 h后患侧乳酸升高,1 d达高峰;3 d时开始降低;N-乙酰天门冬氨酸(NAA)于脑缺血6 h即有降低,24h降到最低,3 d后开始升高,7 d时接近正常水平,各时间点患侧乳酸、NAA值与健侧对应区、对照组及假手术组比较,差异有显著意义(P＜0.05).脑缺血组水分子表观弥散系数(ADC)6 h后降低,1 d以后又开始逐渐上升,并始终保持上升趋势,与对照组、假手术组及健侧比较,差异有显著意义(P＜0.05).脑缺血组大鼠脑缺血6 h后AQP4表达开始上升,1 d时达最高水平,3 d后AQP4仍高但逐渐降低,于7 d时接近正常水平,与对照组及假手术组相比差异有显著性(P＜0.05).RT-PCR和Western Blot结果几乎都显示AQP4的表达与乳酸相关性不明显(rW=0.574,rRT=0.609,P＞0.05),而与NAA呈明显负相关(rRT=-0.957,rW=-0.974,P＜0.05),大鼠脑缺血1 d后AQP4的表达与ADC呈明显负相关(rRT=-0.994,rW=-0.998,P＜0.05),乳酸与ADC相关性差(r=-0.731,P＞0.05),NAA与ADC相关性好(r=0.995,P＜0.05).结论AQP4在大鼠脑水肿的形成和消除中均起重要作用,NAA与血管性脑水肿有关,与AQP4亦有很好的相关性.