大蒜素和亚硒酸钠对结肠癌细胞微卫星序列不稳定的抑制作用

摘要

目的 :以RER(replicationerror)表型的结肠癌细胞作靶细胞 ,研究大蒜素 (diallyltrisulfide ,DAT)和亚硒酸钠对肿瘤细胞微卫星序列 (microsatellitesequence,MS)突变的影响。方法 :将含有外源性MS ,(ca) 14,的穿梭质粒 pCMV CAR转染RER+ 或RER-结肠癌细胞株RKO或SW 480。外源性 (ca) 14 的突变可使质粒标记基因LacZ恢复正常读码 ,表达产生β 半乳糖核苷酶 ,后者使X gal变蓝。DAT及亚硒酸钠对MS突变的影响可直接通过X gal染色结果而判断出来。结果 :外源性 (ca) 14 的突变只发生于RKO细胞而不发生于SW 480细胞。使用DAT0 0 0 15 μg/ml及 0 0 15 μg/ml以及亚硒酸钠 5 μmol/L ,对细胞活力及增殖无影响 ,经作用 5天 ,均显示出对外源性(ca) 14 的突变有明显的抑制效应。但是低浓度亚硒酸钠 1μmol/L作用 5天 ,其抑制 (ca) 14 突变的作用不明显 ,延长作用时间到 5～ 6周 ,则又表现出对 (ca) 14 突变的明显抑制效应。结论 :外源性MS与内源性MS一样在RER+ 细胞中是不稳定的。DAT和亚硒酸钠能抑制RER+ 细胞中外源性 (ca) 14重复序列突变 ,提示它们对人癌细胞MS遗传不稳定有保护作用。