可溶性CD40配体对肺癌细胞 A549的生物学作用及其机制研究

摘要

背景与目的:尽管对 CD40分子在 B细胞中的功能已有深入的研究,但 CD40在肺癌细胞中的功能目前知之甚少.本研究旨在探讨可溶性 CD40配体(solublE-CD40 ligand, sCD40L)对肺癌细胞株 A549(CD40表达阳性细胞株)的生物学作用及其相关机制.方法:采用四氮唑盐(MTT)比色、 3H标记胸腺脱氧嘧啶核苷( 3H-TdR)掺入法检测 sCD40L对 A549细胞增殖的影响,免疫荧光标记和流式细胞术测定细胞表型及细胞周期的改变,流式细胞术、逆转录聚合酶链式反应( RT-PCR)及 Western blot分析测定 sCD40L对 A549细胞凋亡的影响及 Bcl-2、 Bax基因表达的变化.结果:(1) sCD40L可抑制 A549细胞的增殖(与对照组比较 P< 0.05).(2) sCD40L作用 72 h后, A549细胞表面 CD49e、 CD54、 TNFRⅠ及 CD95L的表达 [分别为( 61.2± 4.8)%,( 31.2± 6.1)%,( 42.7± 5.9)%,( 38.2± 3.4)% ]较对照组 [分别为 (34.7± 2.1)%, (7.1± 1.6)%, (15.2± 4.1)%, (10.1± 2.3)% ]明显升高,而 TNFRⅡ的表达 [( 8.7± 0.8)% ]较对照组 [( 58.1± 3.6)% ]下降.( 3) sCD40L作用 72h后, A549细胞 G1 期细胞比例 [(76.0± 9.1)% ]较对照组 [(56.7± 6.9)% ]增加, S期细胞比例 [(10.3± 5.7)% ]较对照组 [(32.7± 5.5)% ]减少. ( 4) sCD40L在短期( 72 h)内并不引起 A549细胞明显凋亡,但可上调 Bax的表达.结论: sCD40L可引起肺癌细胞 A549生长抑制,细胞周期和表型改变,并可引起凋亡相关基因表达的改变.