低氧对紫杉醇诱导的人卵巢癌细胞A2780凋亡的影响及其机制

摘要

背景与目的:低氧作为实体瘤的特征和重要的生存微环境,可能与化疗耐药相关.我们认为低氧与卵巢癌化疗耐药可能相关.本研究建立低氧模型,探讨低氧、低氧诱导因子1 α(HIF-1α)对紫杉醇诱导的人卵巢癌细胞A2780凋亡的影响.方法:体外培养的A2780细胞中加入化学性低氧诱导剂氯化钴(CoCl2),诱导并制作低氧模型.将细胞分为4组:A组(对照)、B组(常氧培养加紫杉醇)、C组(低氧培养加紫杉醇)、D组(低氧培养加Decoy加紫杉醇).用诱骗法(Decoy)阻断HIF-1α功能,Western blot、RT-PCR、TUNEL和流式细胞术分别检测各组细胞HIF-1α蛋白、mRNA的表达水平及细胞凋亡情况.结果:CoCl2能明显增加A2780细胞HIF-1α蛋白的表达,而对其mRNA的表达无明显影响,Decoy法阻断HIF-1α的功能,对其蛋白和mRNA的表达无明显影响.TUNEL检测发现,B组凋亡指数[AI:(41.12±25.65)%]显著高于C组[AI:(24.12±15.19)%](P＜0.05);低氧阻断了HIF-1α功能后,D组凋亡指数[AI:(35.19±21.73)%]较C组明显增加(P＜0.05).流式细胞仪检测细胞凋亡率结果与TUNEL检测结果类似.结论:低氧能保护A2780细胞抵抗化学治疗,HIF-1α可能在紫杉醇诱导的细胞凋亡中发挥重要的抗凋亡作用.