表皮生长因子受体信号通路在MCF-7细胞对三苯氧胺产生耐药中的作用

摘要

背景与目的:以三苯氧胺(tamoxifen,TAM)为代表的内分泌治疗是乳腺癌综合治疗的重要组成部分,研究内分泌治疗耐药的机制、寻找克服耐药的方法有十分重要的意义。表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)在多种肿瘤中表达。在乳腺癌组织中EGFR的阳性表达提示乳腺癌的预后较差。我们选择雌激素受体(estrogenreceptor,ER)阳性的乳腺癌细胞株MCF-7,研究EGFR信号转导通路在TAM产生耐药过程中的作用。方法:ER(+)乳腺癌细胞株MCF-7,持续给予TAM(10-7mol/L)处理形成耐药后,采用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(fluorescentquantitationreversetranscription-polymerasechainreaction,fqRT-PCR)及Westernblot方法,分析EGFR信号通路成分与ER在处理前后的改变,并研究EGFR抑制剂AG1478对耐药细胞的作用。结果:MCF-7细胞给予TAM处理的早期表现为细胞生长的抑制,持续用药(6个月)后,细胞生长速度恢复到用药前水平,细胞生长抑制试验表明MCF-7细胞对TAM耐受。此时耐药MCF-7细胞中EGFRmRNA表达量增加了4.5倍,EGFR蛋白水平明显增加,其下游通路中的细胞外信号调节激酶磷酸化水平(phosphorylation-extracellularsignal-regulatedkinase,p-ERK1/2)也明显提高(P<0.05),提示EGFR信号转导通路的活性水平增高,而ER蛋白水平无明显变化。同时,耐药MCF-7细胞对EGFR抑制剂AG1478的敏感性增强。结论:ER+的乳腺癌细胞长期给予TAM处理,可通过EGFR信号转导通路的活性水平提高而对内分泌治疗产生耐药,同时给予EGFR抑制剂可提高内分泌治疗的效果。