Avastin阻断VEGF促横纹肌肉瘤细胞株RH4增殖的作用

摘要

背景与目的:血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)及其通路的研究是目前研究的热点之一,但其在横纹肌肉瘤中的研究鲜有报道,其作用机制尚不完全清楚。本研究通过检测横纹肌肉瘤细胞株RH4中VEGF及其受体的表达情况,以了解VEGF在横纹肌肉瘤中的作用及机制,并研究Avastin阻断VEGF促细胞增殖的作用。方法:使用RT-PCR方法检测RH4细胞株中VEGF、VEGFR1、2、3mRNA的表达;使用ELISA方法检测培养液上清中VEGF的分泌水平;使用Westernblot方法检测VEGFR1蛋白的表达水平;使用直接计数的方法检测VEGF、Avastin对RH4细胞增殖的影响。结果:RT-PCR和ELISA结果显示在RH4细胞中存在VEGF的表达和分泌;在RH4细胞中仅有VEGFR1表达,VEGFR2和VEGFR3均为阴性;Westernblot的结果进一步证实了VEGFR1在RH4中的表达。VEGF可直接促进RH4细胞的增殖,在0～100ng/ml的区间其促进增殖的作用随着浓度的增加而增加。10～40μg/mlAvastin可以阻断VEGF的促增殖作用。结论:在横纹肌肉瘤细胞RH4中VEGF可以通过自分泌的方式作用于自身,并通过VEGFR1促进肿瘤细胞的增殖,Avastin可以阻断VEGF的促增殖作用。