三氧化二砷对人横纹肌肉瘤RD细胞株细胞凋亡及Bcl-2、Caspase3表达的影响

摘要

目的：研究三氧化二砷(As2O3)诱导人横纹肌肉瘤RD细胞凋亡的作用及其对Bcl-2、Caspase3表达的影响.方法：分别以不同浓度的As2O3处理人横纹肌肉瘤RD细胞,实验分为A(对照组)、B、C、D4组.细胞培养液中As2O3的药物终浓度分别为0umol/l、4umol/l、6umol/l、8umol/l,共同培养24h后收集细胞,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖抑制率,应用Annexin-V和PI双染细胞流式法检测细胞凋亡率,酶联免疫吸附法及Caspase3活性检测试剂盒分别测定RD细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Caspase3表达情况.结果：1.MTT结果示实验组均可明显抑制RD细胞增殖,其增殖抑制率较对照组明显增加(P＜0.01),且随着As2O3浓度的增加,其增殖抑制率逐渐升高.各组增殖抑制率依次为(10.25±0.215)％,(18.33±0.317)％,(24.07±0.211)％,(30.47±0.216)％,其中8umol/l As2O3作用于RD细胞24 h以后细胞增殖抑制率最大.2.流式细胞术结果示实验组细胞凋亡率较对照组明显增加(P＜0.01),且与As2O3呈浓度依赖性,各组细胞凋亡率依次为(1.71±0.302)％,(15.56±0.405)％,(38.63±0.416)％,(46.43±0.531)％,其中8umol/I As2O3作用于RD细胞24h后细胞凋亡率最大.3.酶联免疫吸附法结果示Bcl-2在As2O3作用24h后表达水平下降,实验组与对照组相比差异具有统计学意义(P＜/span＞＜0.01).4.Caspase3活性检测结果示实验组Caspase3活性较对照组明显增加,各组间比较差异均具有统计学意义(P＜/span＞＜0.01).结论：As203能有效抑制RD细胞增殖和诱导其调亡，其抗肿瘤机制可能与下调凋亡相关蛋白Bcl-2表达及上调Caspase3的表达有关。