神经氨酸酶预处理供体骨髓细胞延长大鼠异体移植物成活时间的观察

摘要

目的筛选神经氨酸酶（Neu）预处理供体骨髓细胞（dBMCs）的最佳浓度,使经大鼠尾静脉注射该浓度Neu后的dBMCs偏向性分布于受体肝脏,并观察Neu预处理dBMCs（Neu-dBMCs）联合环孢素A（CsA）短期应用对异体皮片成活时间的影响。方法供体为雄性SD大鼠49只,受体为雌性Wistar大鼠49只。常规制备dBMCs并留取供体皮片备用。Neu预处理浓度筛选实验：按Neu终浓度将26只受体大鼠随机分为0、0．5、1．0、2．0 U/ml 4组（各组分别为6、8、6、6只）,用上述4种浓度Neu预处理dBMCs,以99mTc-SnCl2法标记,再经受体尾静脉注入,5h后取受体各主要器官,测定其放射性活度,计算出各器官的放射性活度占全部所测器官总放射性活度的百分比,筛选出使dBMCs偏向性分布于受体肝脏的最佳Neu预处理浓度。异体皮片移植实验：将余下23只受体大鼠随机分为对照组、dBMCs组和Neu-dBMCs组,每组均行异体皮片移植,其中后两组在手术当天经尾静脉分别输注dBMCs和Neu-dBMCs（Neu为筛选出的最佳浓度）,并分别于术后第2、5天腹腔注射CsA （10 mg/kg）,观察各组异体皮片的成活情况。结果在Neu预处理浓度为1．0U/ml时,受体肝脏内dBMCs呈偏向性分布,其百分比为（75．3±9．8）%,明显高于其他浓度组,与0 U/ml组[（58．9±4．2）%]比较差异有统计学意义（P＜0．01）。1．0 U/ml为Neu的最佳浓度。Neu-dBMCs组的同种异体皮片成活时间较dBMCs组明显延长,两组比较差异有统计学意义（P＜0．05）。这两组异体皮片成活时间均较对照组明显延长（P＜0．01）。结论适当浓度的Neu预处理可增强dBMCs与肝脏的亲和性,使经外周静脉输注的dBMCs偏向性分布于受体肝脏内。Neu-dBMCs短期联合应用CsA可明显延长移植的供体皮片成活时间。