血小板源性生长因子BB对大鼠肌腱愈合和肌腱粘连的影响

摘要

目的了解血小板源性生长因子BB（PDGF-BB）基因转染大鼠肌腱细胞对肌腱愈合及肌腱粘连的影响。方法将90只SD大鼠制成跟腱损伤模型,按随机数字表法分为3组,每组30只:实验组,肌腱断端注射20μL转染PDGF-BB基因的大鼠肌腱细胞（1×10~8个/mL）;对照组,肌腱断端注射20μL未行转染的大鼠肌腱细胞（1×10~8个/mL）;空白对照组,不做任何处理。6-0丝线行改良Kessler法缝合跟腱,管型石膏固定1周。通过基因测序及RT-PCR鉴定转染PDGF-BB基因的大鼠肌腱细胞。分别于术后3 d和1、2、4、8周取各组大鼠肌腱组织样本,行大体、组织学观察以及生物力学检测,对比各组肌腱粘连度、组织中Fb数量与胶原纤维含量、肌腱最大抗拉力及最大滑动距离、组织中PDGF-BB的浓度。对数据行t检验。结果 （1）转染的肌腱细胞经RT-PCR以及基因测序证实在体外稳定表达PDGF-BB mRNA。（2）各组大鼠术后3 d肌腱均出现较明显肿胀及炎性细胞浸润,实验组改变较其他组明显轻微;随后各组情况均逐渐好转。术后4、8周肌腱粘连度分级组间比较未见明显差异。（3）实验组Fb数在术后2、4、8周显著低于对照组和空白对照组（t值分别为2.94、4.26、5.76和4.00、3.83、6.12,P＜0.05或P＜0.01）。（4）实验组术后4周胶原纤维含量为（43±6）%,较对照组[（55±8）%]与空白对照组[（61±8）%]显著下降（t值分别为2.94和4.41,P＜0.05或P＜0.01）。（5）术后4、8周实验组肌腱最大滑动距离为（3.25±0.33）、（3.65±0.21）mm,显著高于对照组的（2.29±0.40）、（2.21±0.37）mm和空白对照组的（2.01±0.23）、（1.89±0.24）mm（t值分别为4.53、8.29和7.55、13.52,P值均小于0.01）,但其肌腱最大抗拉力与另2组比较差异无统计学意义（t值分别为0.41、0.41和0.77、0.72,P值均大于0.05）。（6）术后3 d和2、4周,实验组肌腱组织中PDGF-BB浓度为（12.95±1.36）、（8.32±0.94）、（9.10±1.06）ng/mL,均显著高于对照组的（1.13±0.21）、（2.07±0.48）、（3.85±0.39）ng/mL（t值分别为21.04、14.50、11.39,P值均小于0.01）。结论转染PDGF-BB基因肌腱细胞有促进肌腱内源性愈合、减轻肌腱粘连的作用。