不同浓度腐胺对人脐静脉内皮细胞生物学行为的影响

摘要

目的探讨不同浓度腐胺对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）增殖、迁移、凋亡的影响。方法常规培养HUVEC,取第3~5代细胞进行以下实验。（1）按随机数字表法（分组方法下同）将细胞分为500、1 000、5 000μg/mL腐胺组,每组3孔,分别以含相应浓度腐胺的完全培养液培养24 h后,采用倒置光学显微镜观察细胞形态。（2）将细胞分为0.5、1.0、5.0、10.0、50.0、100.0、500.0、1 000.0μg/mL腐胺组及对照组,每组4孔。各腐胺组细胞采用含相应浓度腐胺的完全培养液、对照组采用不含腐胺的完全培养液培养24 h后,采用比色法测定细胞增殖活性,结果以吸光度值表示。（3）同实验（2）将细胞分组（每组1孔）及培养后,Transwell迁移实验测定细胞迁移能力。（4）同实验（2）将细胞分组（每组l瓶）及培养后,采用流式细胞仪测定细胞凋亡率。对数据进行单因素方差分析、Kruskal-Wallis检验、Dunnett检验。结果（1）培养24 h后,500μg/mL腐胺组细胞贴壁良好,形态无明显改变;l 000μg/mL腐胺组细胞贴壁减少,细胞变小、变圆;5 000μg/mL腐胺组细胞未贴壁、呈碎片状。（2）0.5、1.0、5.0、10.0、50.0、100.0、500.0、1 000.0μg/mL.腐胺组及对照组细胞增殖活性分别为0.588±0.055、0.857±0.03l、0.707±0.031、0.662±0.023、0.450±0.019、0.415±0.014、0.359±0.020、0.204±0.030、0.447±0.021,组间总体比较差异明显（χ~2=6.86,P=0.009）。0.5、1.0、5.0、10.0μg/mL腐胺组细胞增殖活性较对照组升高（P＜0.05或P＜0.01）,500.0、1 000.0μg/mL腐胺组细胞增殖活性较对照组降低（P值均小于0.01）,50.0、100.0μg/mL腐胺组细胞增殖活性与对照组相近（P值均大于0.05）。（3）各腐胺组及对照组迁移细胞数组间总体比较差异明显（F=138.662,P＜0.001）。1.0、5.0、10.0μg/mL腐胺组迁移细胞数多于对照组（P值均小于0.01）,500.0、1 000.0μg/mL腐胺组迁移细胞数少于对照组（P值均小于0.01）,0.5、50.0、100.0μg/mL.腐胺组迁移细胞数与对照组相近（P值均大于0.05）。（4）各腐胺组及对照组细胞凋亡率组间总体比较差异明显（χ~2=3.971,P=0.046）。0.5、1.0、5.0、10.0μg/mL腐胺组细胞凋亡率较对照组降低（P值均小于0.05）,500.0、1 000.0μg/mL.腐胺组细胞凋亡率较对照组升高（P值均小于0.01）,50.0、100.0μg/mL腐胺组细胞凋亡率与对照组相近（P值均大于0.05）。结论低微浓度的腐胺能显著促进HUVEC增殖与迁移;而较高浓度的腐胺能显著抑制HUVEC增殖与迁移,并促进细胞凋亡。