PAMAM纳米载体介导pCTGF-shRNA抑制小鼠腹膜间皮细胞CTGF的表达

摘要

目的 研究G9 PAMAM纳米载体介导的结缔组织生长因子(CTGF)短发夹RNA(shRNA)质粒(pCTGF-shRNA)对小鼠腹膜间皮细胞CTGF表达的影响.方法 设计并构建质粒pCTGFl-shRNA、pCTGF2-shRNA和阴性对照pHK-shRNA;应用G9 PAMAM将质粒分别转染4.25%葡萄糖刺激下的第3代小鼠腹膜间皮细胞;采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)检测细胞CTGF mRNA水平,采用Western Blot检测CTGF蛋白含量.结果 4.25%葡萄糖可刺激小鼠腹膜间皮细胞CTGF的mRNA和蛋白表达明显上调.pCTGFl-shRNA转染组和pCTGF2-shRNA转染组的CTGF表达较高糖组明显下调(P＜0.05),尤其以pCTGF2-shRNA组显著.pHK-shRNA转染组与高糖组比较,差异无显著性(P＞0.05).结论 G9 PAMAM纳米载体可介导pCTGF-shRNA转染原代小鼠腹膜间皮细胞,并能抑制高糖诱导的CTGF表达上调,提示PAMAM介导的pCTGF-shRNA可有效地用于腹膜纤维化的基因治疗.