胞浆内精子注射技术生产小鼠

摘要

以piezo操作系统为技术支撑,在掌握小鼠卵母细胞胞浆内精子注射技术(ICSI)的基础上,进行了ICSI技术生产试管小鼠的尝试.来自成年昆明(KM)小鼠附睾尾的新鲜精子,剪切去尾后,直接将精子头注射到B6D2F1小鼠卵母细胞质中,注射后1 h,83.3%的卵母细胞存活.6 h时,84.0%的成活卵子成功受精,形成原核,排出PB2.体外培养的ICSI胚胎,卵裂率(98%vs 94.7%)和4-细胞期胚胎比率(89.5%vs 92.1%)均与培养的体内受精卵没有差异(P＞0.05);但是,桑椹胚(63.8%vs 84.2%)和囊胚发育率(25.7%vs 68.4%)极显著地(P＜0.01)低于对照组.120枚原核期胚胎移植给7只假孕受体后,4只受孕小鼠共产出28只ICSI小鼠(23.3%).健康成年的25只ICSI小鼠都没有明显的生理和行为异常.随机选择其中的20只小鼠,分别进行ICSI小鼠间、ICSI与KM小鼠间共12组的交配,结果所有雌鼠妊娠产仔.在成功建立小鼠ICSI技术的基础上,成功获得了我国的首例ICSI小鼠,并且证明这些ICSI小鼠都具有正常的繁殖后代的能力.