柑橘衰退病毒多克隆和单克隆抗体的制备及检测效果分析

摘要

通过改进提纯方法获得了柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)的提纯液,其产量为1mg/100g植物组织.用CTV免疫大耳白兔,获得多克隆抗体,间接ELISA效价为1:25 600.用CTV免疫小鼠,经细胞融合、ELISA筛选和克隆化培养,获得18株能稳定分泌抗CTV单克隆抗体的杂交瘤单细胞株.对其中4株单克隆腹水抗体进行分析的结果表明,这些抗体的ELISA效价为1:51 200～1:204 800,其中2G和3H的抗体类型及亚类为IgG2a,1E和4H为IgG2b.用所制备抗体对不同来源柑橘样品的CTV检测结果显示,单克隆和多克隆抗体结合使用,采用三抗体夹心ELISA(TAS-ELISA)可以获得理想的检测效果,其特异性强、灵敏度高.同时发现所分析4株单克隆抗体对不同的CTV分离物鉴别能力存在差异,但有关这些CTV分离物的特性及其血清学关系还需进一步研究.