猪羊水干细胞特异向跳动心肌细胞诱导分化

摘要

为了筛选并建立一种由猪羊水干细胞向心肌细胞分化的有效方法,以猪羊水干细胞为研究对象,以5-氮胞苷(5-aza)和维生素C(Vc)为诱导剂,对猪羊水干细胞形成的类胚体(Ebs)进行诱导分化.应用免疫荧光、RT-PCR、透射电镜技术检测跳动细胞团中心肌特异性标记的表达情况.结果显示,在猪羊水干细胞形成的类胚体中加入心肌细胞诱导剂,10d后即见到节律性跳动的细胞团,t检验发现0.1 mmol/L Vc加5μmol/L 5-aza联合诱导组的诱导效率最高,达33%.免疫荧光结果显示跳动心肌细胞团表达细胞骨架蛋白α-actin和肌钙蛋白Tnni3.RT-PCR检测跳动心肌细胞团,发现心肌细胞特异性标记分子TbX5、Gata4、a-MHC、Tnni3均呈阳性表达.借助透射电镜观察诱导后的跳动样细胞团,能清晰可见其中的肌丝、糖原粒、糖原池等结构.说明5-氮胞苷和维生素C可以促进猪羊水干细胞向心肌细胞的诱导分化.