海藻酸SiO_2杂化凝胶固定化洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶的研究

摘要

利用四乙氧基硅烷(TEOS)原位水解法将SiO_2掺杂于海藻酸(ALG)凝胶中,通过双交联制备出新型ALG-SiO_2杂化凝胶以固定化洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶.结果表明,固定化酶的最优条件:质量分数为2.0%的ALG、0.2 mol/L CaCl2、V(ALG)/V(TEOS)为5、加酶量为1 g ALG 加100 mg酶粉、固定化60 min、采用直径为0.8 mm的针头滴定、真空冷冻干燥.在此条件下,酶蛋白的包埋率可达100%,酶活回收率可达91%.固定化酶的最适 pH 为 8.0,最适作用温度为50 ℃,重复使用8次后,酶活性仍能保持80%以上.ALG-SiO_2杂化凝胶的场扫描电镜(FESEM)观察发现凝胶的整体构造仍然是海藻酸凝胶骨架;与ALG凝胶平滑的内部相比较,杂化凝胶仍具有完整的网络结构,但内部更为粗糙,结构更为致密.