去氧鬼臼毒素对结肠癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

摘要

目的:探讨去氧鬼臼毒素（DPPT）是否通过调控长链非编码RNA ZFPM2-AS1（LncRNA ZFPM2-AS1）/微小RNA-515-5p（miR-515-5p）分子轴而抑制结肠癌细胞增殖、迁移及侵袭。方法:体外培养人结肠癌LoVo细胞，随机分为Control组、DPPT-L组、DPPT-M组、DPPT-H组。甲基噻唑基四唑（MTT）检测细胞增殖；Transwell小室实验检测迁移及侵袭；实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测ZFPM2-AS1、miR-515-5p的表达水平；LoVo细胞中转染pcDNA-ZFPM2-AS1，采用上述方法检测细胞增殖、迁移及侵袭；双荧光素酶报告实验验证ZFPM2-AS1、miR-515-5p的靶向关系；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞周期蛋白1（CyclinD1）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、P21的表达量。结果:与Control组比较，DPPT-L组、DPPT-M组、DPPT-H组细胞存活率降低（ P<0.05），迁移细胞数、侵袭细胞数减少（ P<0.05），CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白水平降低（ P<0.05），P21蛋白水平升高（ P<0.05），ZFPM2-AS1表达水平降低（ P<0.05），miR-515-5p表达水平升高（ P<0.05），且DPPT-L组、DPPT-M组、DPPT-H组上述指标比较，差异均有统计学意义（ P<0.05）；ZFPM2-AS1可靶向结合miR-515-5p；与DPPT-H+pcDNA组比较，DPPT-H+pcDNA-ZFPM2-AS1组细胞存活率升高（ P<0.05），迁移细胞数、侵袭细胞数增多（ P<0.05），CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白水平升高（ P<0.05），P21蛋白水平降低（ P<0.05）。 结论:DPPT可能通过下调ZFPM2-AS1的表达及上调miR-515-5p的表达从而抑制结肠癌细胞增殖、迁移及侵袭。