重组人突变型TNF—α在大肠杆菌中的诱导表达及高效纯化

摘要

目的：建立重组人突变型ＴＮＦ－α的纯化工艺，获得ＴＮＦ－α纯品，为下游规模生产打基础，方法：诱导表达重组ＴＮＦ－α突变体蛋白，用ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦ、ＣＭ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦ两步层析结合小范围线性梯度洗脱法纯化。结果：所得重组蛋白的纯度达９８％以上，比活达１．７×１０＾９ｕ／ｍｇ蛋白，无热原。结论：此纯化方法可对重组ＴＮＦ－α突变体蛋白进行高效快速纯化，易于实现规模化生产。