蛋白激酶B激活对脑缺血再灌注海马CA3区神经元的保护作用

摘要

目的探讨丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶B（Protein kinase B,Akt）对脑缺血再灌注损伤后海马CA3区神经元的保护作用。方法采用四动脉结扎法建立大鼠全脑缺血模型,再灌注0 min、30 min、3 h、6h、12 h、1 d和3 d各时间点,运用免疫印迹技术检测海马CA3区Akt1的磷酸化水平,采用免疫组化和焦油紫染色分别检测LY294002（P13K/Akt特异性抑制剂）对缺血再灌注后磷酸化Akt1（p-Akt1）的表达及神经元存活的影响。结果缺血再灌注后30 min,与假手术（sham）组相比,海马CA3区p-Akt1的表达显著升高（P＜0.05）,再灌后3 h至峰值,一直持续至3 d仍维持在较高水平（P＜0.05）;与相应的再灌注组相比,给予LY294002后,p-Akt1的蛋白表达明显降低[R6 h组和LY294002+R6 h组的阳性细胞数（个/mm~2）分别为（134.6±7.8）和（54.8±5.1）],海马CA3区的神经元大量死亡[R5 d组和LY294002+R5 d组神经元数量（个/mm~2）分别为（152.0±17.4）和（62.7±5.1）]（P＜0.05）。结论脑缺血再灌注后蛋白激酶Akt的持续激活,是海马CA3区神经元存活的重要因素。