半乳糖凝集素-1在神经母细胞瘤组织中的表达及其对细胞增殖和侵袭的影响

摘要

目的探讨半乳糖凝集素-1(Galectin-1)在神经母细胞瘤(NB)组织中的表达以及下调该基因对细胞增殖和侵袭能力的影响。方法选取2010年1月至2018年1月在潍坊医学院附属益都中心医院儿内科初次治疗且资料完整的NB患儿62例,采用免疫组织化学法检测患儿NB组织中Galectin-1的蛋白表达。培养NB细胞株SH-SY5Y,分为siRNA-Gal1组(转染Galectin-1干扰序列siRNA-Gal1)、siRNA-NC组(转染阴性对照序列siRNA-NC)和空白组(不作任何处理),采用实时荧光定量PCR法检测3组Galectin-1的表达,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测3组细胞的增殖活性,Transwell法检测3组细胞的迁移和侵袭力,Western blot法检测3组Galectin-1、上皮钙黏着蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的蛋白表达水平。结果62例患儿组织中,Galectin-1蛋白阳性表达率为69.35%,且在国际神经母细胞瘤分期系统分期Ⅲ~Ⅳ期、危险度分层高危组及发生骨转移的患儿NB组织中Galectin-1蛋白阳性表达率(78.57%、78.05%、84.00%)较Ⅰ~Ⅱ和Ⅳs期、低中危组、无骨转移者(50.00%、52.38%、59.46%)高,差异均有统计学意义(均P<0.05);siRNA-Gal1组与siRNA-NC组和空白组相比,细胞中Galectin-1 mRNA(0.23±0.06、1.04±0.05、1.00±0.08)和蛋白表达量(0.23±0.05、0.86±0.06、0.84±0.05)均降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);siRNA-Gal1组24 h、48 h、72 h和96 h时的细胞吸光度值均低于siRNA-NC组和空白组,差异均有统计学意义(均P<0.05);siRNA-Gal1组与siRNA-NC组和空白组比较,细胞迁移能力(101.55±5.56、137.24±5.14、132.76±7.46)和侵袭能力(78.21±5.08、114.46±7.31、120.06±6.47)均明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.001);siRNA-Gal1组与siRNA-NC组和空白组比较,Vimentin蛋白表达量(0.24±0.03、0.69±0.07、0.70±0.06)均降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);而E-cadherin蛋白表达量(0.77±0.09、0.29±0.05、0.33±0.04)均升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论Galectin-1蛋白在NB组织中阳性表达率为69.35%,可能参与了NB的恶性化过程,沉默Galectin-1的基因表达可抑制NB细胞的增殖、迁移和侵袭力,其机制可能与抑制上皮-间质转化过程有关。