干扰素-γ对支气管上皮细胞表达白三烯受体半胱氨酰白三烯受体1的调节

摘要

目的 研究白三烯受体半胱氨酰白三烯受体1(CysLT1)在支气管上皮细胞中的表达,探讨炎性因子IFN-γ是否参与调节白三烯受体的表达.方法 反转录-PCR(RT-PCR)法检测支气管上皮细胞(BEAS-2B、16HBE、原代细胞)CysLT1 mRNA.采用IFN-γ刺激细胞48 h,RT-PCR法检测CysLT1 mRNA,Western Not法检测细胞膜CysLT1蛋白表达.结果 采用Taq DNA聚合酶RT-PCR法在支气管上皮细胞上未能扩增到CysLT1 mRNA,改用KODTMDNA聚合酶在经过IFN-γ刺激的支气管上皮细胞(BEAS-2B、16HBE、原代细胞)中扩增到CysLT1 mRNA.当IFN-γ水平分别为0、0.1μg·L-1、1.0μg·L-1、10.0μg·L-1、50.0μg·L-1、100.0μg·L-1时,CysLTq mRNA/β-actin相对密度比为0.420±0.013、0.560±0.008、0.680±0.011、1.230±0.023、1.350±0.016、1.880±0.021.当IFN-γ水平分别为0、1.0μg·L、10.0 μg·L-1、50.0 μg·L-1、100.μg·L-1时,CysLT1蛋白相对密度为3.09±0.17、13.27±0.33、27.44±0.29、29.25±0.24、31.42±0.49(P<0.01).提示IFN-γ能上调CysLT1在mRNA水平和蛋白水平的表达,这种上调作用呈浓度依赖性.结论 支气管上皮细胞不仅是一种屏障细胞,也是一种效应细胞,能表达炎性介质白三烯受体CysLT1.上呼吸道感染时局部产生的大量炎性介质IFN-γ,使上皮细胞CysLT1表达上调,增强了白三烯对呼吸道的炎症效应,这可能是病毒性呼吸道感染诱发喘息的机制之一.