PRRSV BJ-4株ORF5基因的原核表达与重组蛋白的纯化

摘要

为成功表达猪繁殖与综合征病毒(PRRSV)结构蛋白GP5,通过PCR方法从重组质粒pGEM-ORF5扩增得到缺失N端疏水序列的基因片段dORF5(deleting ORF5).将dORF5克隆至原核高效表达载体pGEX-4T-2,在E.coli BL21细胞中成功表达了重组蛋白GST-dORF5,表达产物以包涵体的形式存在,表达量为20.8%.Western-Blot结果表明重组蛋白可被PRRSV阳性血清所识别.利用融合肽进行亲和层析得到高纯度的重组蛋白,为进一步研究PRRS病毒结构蛋白的结构和功能奠定了基础.