应用GPV VP3基因重组原核表达产物建立检测抗体的ELISA方法研究

摘要

利用鹅细小病毒(GPV)VP3基因的原核表达蛋白作为包被抗原建立了检测GPV抗体的间接-ELISA及Dot-ELISA方法.经确定两种方法的抗原包被浓度为125μg/mL,其中间接-ELISA 100μL/孔、Dot-ELISA 5 μL/点.间接-ELISA中HRP标记的兔抗鹅IgG的工作浓度是1:200,检测血清的最适稀释度是1:400,阳性判定标准为OD492≥0.20,且P/N≥2.0.用此方法检测弱毒疫苗免疫血清,其抗体滴度在1:400～1:51 200.Dot-ELISA的结果与间接-ELISA的结果一致.