Bcl-2基因RNA干扰对体外培养的鹅卵泡颗粒细胞凋亡、增殖和孕激素分泌的影响

摘要

根据已发表的 Bcl-2 基因序列设计 3 对 siRNA(Small interference RNA)序列,构建干扰表达载体,转染体外培养的鹅卵泡颗粒细胞,48 h后利用流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测颗粒细胞Bcl-2蛋白表达量、凋亡和增殖情况,收集细胞培养液用放射免疫分析法检测孕激素(P)的分泌水平;此外,还检测了 F1～F4卵泡、最小的排卵前卵泡(The smallest preovulatory follicle,SPF)、小黄卵泡(Small yellow follicle,SYF)和闭锁卵泡(Atresic folli-cle)颗粒细胞Bcl-2蛋白表达和凋亡情况.结果表明:(1)各级卵泡颗粒细胞 Bcl-2 蛋白的表达存在着差异,正常卵泡颗粒细胞Bcl-2蛋白表达量显著高于闭锁卵泡(P<0.05),SPF颗粒细胞Bcl-2蛋白表达水平显著高于SYF(P<0.05);(2)干扰组Bcl-2蛋白表达水平显著低于所有对照组(P<0.05),而细胞凋亡指数(Apoptosis index,AI)、增殖指数(Proliferation index,PI)和P分泌水平均高于对照组.