鸡脂蛋白酯酶基因启动子的克隆及活性分析

摘要

本文旨在研究鸡脂蛋白酯酶基因(lipoprotein lipase,LPL)启动子的结构和启动子活性.采用PCR方法扩增了鸡LPL基因5′侧翼区2 kb的DNA片段,对其进行克隆、测序及序列分析后,构建了其全长及系列截断突变的报告基因表达载体,瞬时转染鸡胚成纤维细胞(DF-1),用双荧光素酶报告系统测定了荧光素酶活性.生物信息学分析发现,鸡LPL基因启动子区存在Oct-1、GC box、CCAAT、GATA、AP1等调控元件,在启动子-575～+137 bp区域内存在一个CpG岛.报告基因分析表明,鸡LPL基因的启动子-359～+163 bp区域就具有启动子活性,启动子-601～+163 bp区域具有最强的启动子活性.结果显示,鸡LPL基因受多种转录因子和上游序列的调控,本研究为深入研究鸡LPL基因的表达调控机制奠定了基础.