YWHAG基因CDS的克隆及其在梅山与杜洛克猪卵泡发育中的差异表达研究

摘要

本研究旨在探讨YWHAG(Tyrosine 3-monooxygenase/tryptophan 5-monooxygenase activation protein,gamma polypeptide)基因在猪卵泡发育中的表达规律及其与卵泡发育的关系.从猪卵泡组织中克隆YWHAG基因CDS(Coding region)区全序列,采用半定量RT-PCR和Real-time PCR方法检测YWHAG基因在不同组织中的表达谱信息,并进一步分析了该基因在梅山、杜洛克猪L、M2、M1、S各级别卵泡中的表达变化.结果显示:克隆得到了猪YWHAG基因780 bp编码区全序列,通过与人、小鼠、牛YWHAG基因CDS区BLAST比对,其同源性分别为97.72％、96.68％和98.57％.YWHAG基因在肌肉、肝、脂肪、肺、心、脾、肾、子宫、输卵管、小肠、胃、卵巢、垂体、下丘脑等组织中均有表达,尤其在脂肪、小肠和大脑中表达较高.YWHAG基因在不同直径卵泡中的表达量的趋势均为M1卵泡和L卵泡最高,M2卵泡次之,S卵泡最低,并且在M1卵泡和L卵泡中的表达量显著高于M2卵泡和S卵泡(P＜o.05).YWHAG基因在梅山猪各级别卵泡中的表达量均高于杜洛克猪(P＜0.05),并且在梅山猪S和M2卵泡的表达量分别极显著高于杜洛克猪(P＜0.01),而在M1卵泡及L卵泡中的表达量无显著差异;结果提示,YWHAG基因可能参与猪卵泡发育中的凋亡过程,从而引起梅山与杜洛克猪在排卵数方面存在差异.