一种适用于狗牙根基因差异表达研究的cDNA-AFLP方法

摘要

本发明涉及一种适用于狗牙根基因差异表达研究的cDNA-AFLP方法，属于生物技术领域。该方法根据狗牙根基因组的表达特点，开发了一种狗牙根特有且成熟的cDNA-AFLP技术体系，可用于其基因差异表达研究，挖掘特定功能基因的目的。技术方案包括：1）双链cDNA的合成及纯化；2）限制性内切酶的酶切；3）酶切产物的接头连接；4）连接产物PCR预扩增；5）PCR选择性扩增；6）聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。本发明建立的cDNA-AFLP方法，不需要预先知道任何序列信息，且多态性强，假阳性低，速度快，更适合对狗牙根转录组进行全面分析，将会对狗牙根重要基因的发掘、克隆及分子标记辅助选择育种和比较基因组学研究等起重要推动作用。