新城疫病毒F蛋白纳米抗体的筛选及活性鉴定

摘要

旨在筛选新城疫病毒(NDV)F蛋白的纳米抗体,并对筛选的抗体活性进行初步鉴定.以NDV F蛋白中和表位构建诱饵,利用酵母双杂交技术对双峰驼天然重链抗体可变区(VHH)酵母双杂交文库进行筛选,获得4株VHH抗体序列.挑选其中2株最符合VHH特征的进行原核表达与纯化,并对2株VHH活性进行鉴定.ELISA结果显示,VHH1与VHH2与NDV病毒的反应性显著高于阴性对照(P＜0.05),表明VHH与NDV病毒反应活性良好;Western blot结果显示,2株VHH可特异性识别F蛋白;细胞中和试验结果表明,2株VHH抗体均具有一定的中和活性.以上结果提示本研究成功筛选出2株活性较好的抗NDV F蛋白的VHH抗体,为VHH在NDV防控中的应用奠定了基础.