维生素C对肉鸡缺氧肺动脉平滑肌细胞缺氧诱导因子-1α转录水平的影响

摘要

旨在体外培养肉鸡肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)的基础上利用氯化钴(CoCl2)建立细胞缺氧模型,探讨维生素C(VC)对缺氧肉鸡PASMCs中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及其下游靶基因血管内皮生长因子(VEGF)及血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)mRNA转录的影响.选用21 d健康AA肉公鸡,分离、培养并鉴定PASMCs,利用CoCl2建立细胞缺氧模型,再用7个浓度的VC(0、50、100、200、500、1 000和1 500 μmol·L 1),5个培养时间(6、12、24、48和72 h)处理,试验共设35个处理,每个处理6个重复.结果表明,利用组织块法可成功培养出肉鸡PASMCs;与对照组相比,不同浓度CoCl2均可使细胞缺氧基因(HIF-1α、VEGF、VEGFR2)转录量显著增加(P＜0.05),促进细胞增殖,250 μmol·L-1 CoCl2处理48 h可成功建立肉鸡PASMCs缺氧模型;500或1 000 μmol·L-1 VC处理48或72 h可显著降低缺氧PASMCs中HIF-1α、VEGFR2 mRNA的转录(P＜0.05),而1 500 μmol·L-1VC则显著增加缺氧PASMCs中HIF-1α、VEGF、VEGFR2 mRNA的转录(P＜0.05).结果提示,缺氧会导致肉鸡肺动脉平滑肌细胞缺氧基因表达量与细胞增殖增加,而VC能降低细胞对缺氧信号的敏感性,使缺氧基因的相对表达量降低.