黄曲霉毒素B1致肉仔鸡肝损伤的氧化应激机制研究

摘要

本试验旨在研究黄曲霉毒素B1(AFB1)对肉鸡原代肝脏细胞线粒体氧化磷酸化、线粒体膜电位、活性氧(ROS)、细胞凋亡、抗氧化酶及其相关基因表达的影响.选取18～20日龄健康爱拔益加(AA)肉鸡分离的肉鸡原代肝脏细胞(BPHs),分为3个处理组,每个处理组5个重复,试验组分别添加1μmol/L和2μmol/L的AFB1,对照组添加等量的DMSO.结果表明:随着AFB1浓度的升高,线粒体Ⅲ和Ⅳ呼吸作用显著增强(P＜0.05),而线粒体呼吸控制率却显著下降(P＜0.05);随着AFB1浓度的升高,线粒体电位下降,并呈现浓度依赖型模式,当AFB1为2.5μmol/L时BPHs线粒体电位显著下降(P＜0.05);AFB1极显著引发了ROS的产生(P＜0.01);高浓度的AFB1(2.5μmol/L)处理使得BPHs细胞凋亡率明显上升(P＜0.05)以及caspase-3、caspase-9表达明显增加(P＜0.05);AFB1显著提高了Nrf2的mRNA表达水平(P＜0.05);与对照组相比,HO-1、SOD的mRNA表达量显著下降(P＜0.05);高浓度的AFB1(2.5μmol/L)显著提高了NQO1的mRNA表达水平(P＜0.05).以上研究结果显示,AFB1使线粒体氧化磷酸化过程解偶联,线粒体膜电位下降,ROS大量产生,抗氧化酶活力降低,细胞发生凋亡,抗氧化酶相关基因mRNA表达下降,而Nrf2基因mRNA表达增强.AFB1导致胞内ROS上升引发氧化应激,可能与Nrf2信号通路有关.