异丙酚预先给药对全脑缺血再灌注大鼠脑的保护作用

摘要

目的观察异丙酚预先给药对大鼠全脑缺血再灌注后细胞凋亡、脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体酪氨酸激酶B(TrkB)mRNA表达的影响,在分子水平上探讨异丙酚对全脑缺血再灌注大鼠脑的保护作用及机制.方法采用Pulsinelli-Brierley四动脉阻断法制备全脑缺血模型.雄性Wistar大鼠57只,体重250～300 g,随机分为假手术组(SH组,n=15);缺血再灌注组(ISC组,n=21);异丙酚预处理组(PPC组,n=21),缺血前静脉注射异丙酚50 mg·kg-1后,用微量泵以1 mg·kg-1·min-1持续静注异丙酚2 h.每组按不同再灌注时间随机分为三个亚组:6 h、24 h、72 h亚组.缺血20 min后,于相应的再灌注时间点断头取脑,脑组织标本切片行HE染色,计数海马CA1区存活细胞数;原位末端标记(TUNEL)法检测凋亡细胞,计算凋亡指数;采用原位杂交技术测定BDNF及TrkB mRNA在海马CA1区表达的阳性率.结果 HE染色光镜检查,PPC组海马CA1区锥体细胞核固缩、缺失等改变较ISC组明显减轻.(1)存活细胞数:各6h亚组差异无显著性;ISC及PPC组的24 h、72 h亚组低于SH组,ISC组又低于PPC组(P＜0.05).(2)凋亡细胞指数:ISC组及PPC组的6 h亚组低于24 h、72 h亚组,24 h亚组又低于72 h亚组(P＜0.01);ISC组6 h、24 h、72 h亚组均高于SH、PPC组,PPC组6 h亚组与SH组差异无显著性,24 h及72 h亚组高于SH组(P＜0.01).(3)BDNF及TrkB mRNA表达程度:与SH组相比,ISC组及PPC组的6 h、24 h亚组,PPC组的72 h亚组,海马CA1区BDNF mRNA表达均增加(P＜0.05或0.01);PPC组的6 h、72 h亚组高于ISC组(P＜0.05);ISC组及PPC组的24 h、72 h亚组TrkB mRNA表达均高于SH组(P＜0.05);ISC及PPC组各亚组间差异无显著性.结论异丙酚预先给药抑制了脑缺血再灌注后神经细胞的凋亡,其机制与BDNF及其受体TrkB的表达上调有关.