N-甲基-D-天门冬氨酸受体2B亚基抗原表位DNA疫苗免疫大鼠的效应

摘要

目的采用N-甲基-D-天门冬氮酸受体2B亚基抗原表位（eNR2B）插入质粒载体pDC515中制备的DNA疫苗（pDC515/eNR2B）免疫大鼠,评价其免疫效应。方法成年雄性SD大鼠40只,体重200～250 g,随机分为4组:对照组（C组）、PBS组、pDC515组和pDC515/eNR2B组,每组10只。PBS组、pDC515组和pDC515/eNR2B组分别肌肉注射PBS 100μl、pDC515 100μg和pDC515/eNR2B 100μg进行免疫,1周后以等剂量再次免疫。于第1次免疫前、第2次免疫后8、14、21 d时,截尾法采集尾静脉血,分离血清,ELISA法检测NR2B抗体水平。于第2次免疫后21d时处死大鼠取脊髓,分别采用免疫组织化学法和Western blot法检测NR2B抗体与自身腰段脊髓组织NR2B特异性结合情况。结果第2次免疫后8d,pDC515/eNR2B组血清中可检测到NR2B抗体,14 d时达高峰,并高滴度持续至21 d（P＜0.05）;C组、PBS组和pDC515组均未检测到相应NR2B抗体;免疫组织化学法和Western blot法检测到pDC515/eNR2B组血清NR2B抗体可与自身脊髓组织NR2B结合。结论pDC515/eNR2B可诱导SD大鼠产生体液免疫反应,所产生的自身抗体在血液中可高滴度存在一定时间。