血红素加氧酶-1对氧糖剥夺海马神经元CDK5-ATM-P53信号转导通路的影响

摘要

目的评价血红素加氧酶-1（HO-1）对氧糖剥夺神经元细胞周期蛋白依赖激酶5（CDK5）-共济失调-毛细血管扩张突变基因（ATM）-P53信号转导通路的影响。方法培养7 d的海马神经元,采用随机数字表法,将其随机分为4组（n=10）:正常培养组（C组）、氧糖剥夺组（D组）、氧糖剥夺+血晶素（HO-1诱导剂）组（D+H组）和氧糖剥夺+血晶素+锌原卟啉（HO-1抑制剂）组（D+H+T组）。C组采用正常培养方法培养。D组神经元进行缺糖、缺氧后复糖、复氧处理。D+H组神经元用10μmol/L血晶素处理24 h后进行缺糖、缺氧后复糖、复氧处理。D+H+T组神经元同时用10μmol/L血晶素和10μmol/L锌原卟啉处理24 h后进行缺糖、缺氧后复糖、复氧处理。培养24 h后,MTT法检测神经元存活情况,TUNEL法检测神经元凋亡情况,RT-PCR法检测HO-1 mRNA表达,Western blot法检测HO-1、CDK5、ATM和P53蛋白表达。结果与C组比较,D组神经元HO-1 mRNA、HO-1、CDK5、ATM和P53蛋白表达上调,神经元存活率降低,神经元凋亡率升高（P＜0.01）;与D组比较,D+H组神经元HO-1 mRNA和HO-1蛋白表达上调,CDK5、ATM和P53蛋白表达下调,神经元存活率升高,神经元凋亡率降低（P＜0.01）;与D+H组比较,D+H+T组神经元HO-1 mRNA和HO-1蛋白表达下调,CDK5、ATM和P53蛋白表达上调,神经元存活率降低,神经元凋亡率升高（P＜0.01）。结论 HO-1可通过阻断氧糖剥夺海马神经元CDK5-ATM-P53信号转导通路抑制神经元凋亡。