一氧化碳释放分子3对大鼠心肌细胞缺氧缺糖/复氧复糖损伤的影响

摘要

目的评价一氧化碳释放分子3（CORM-3）对大鼠心肌细胞缺氧缺糖/复氧复糖损伤的影响。方法清洁级SD大鼠,1~3日龄,原代培养心肌细胞后第5天,采用随机数字表法分为6组（n=36）:正常对照组（C组）、缺氧缺糖/复氧复糖组（OGD/R组）、缺氧缺糖/复氧复糖+灭活的CORM 50μmol/L（iCORM-3）组（iC组）、缺氧缺糖/复氧复糖+CORM-3 12.5μmol/L组（C1组）、缺氧缺糖/复氧复糖+CORM-3 25.0μmol/L组（C2组）和缺氧缺糖/复氧复糖+CORM-3 50.0μmol/L组（C3组）。在培养箱（1%O2-5%CO2-94%N2）中无糖无血清培养基孵育3 h,随后更换DMEM低糖培养基正常培养6 h以制备缺氧缺糖/复氧复糖损伤模型。于缺氧缺糖即刻,C1组、C2组和C3组无糖培养基中加入相应终浓度的CORM-3,iC组加入iCORM-3（终浓度50μmol/L）,复氧复糖时弃去含干预药物无糖培养基。复氧复糖6 h时观察心肌细胞病理学结果,采用CCK-8法检测细胞增殖情况,乳酸-丙酮酸法测定细胞上清液乳酸脱氢酶（LDH）活性,采用流式细胞术检测早期凋亡率。结果与C组比较,其余5组细胞增殖减少,上清液LDH浓度和早期凋亡率升高（P＜0.05）;与OGD/R组和iC组比较,C1组-C3组细胞增殖增多,上清液LDH浓度和早期凋亡率降低（P＜0.05）;与C1组比较,C2组和C3组细胞增殖减少,上清液LDH浓度和早期凋亡率升高（P＜0.05）;与C2组比较,C3组细胞增殖减少,上清液LDH浓度和早期凋亡率升高（P＜0.05）。C1组-C3组心肌细胞病理学损伤较OGD/R组减轻,尤以C1组显著。结论 CORM-3可减轻大鼠心肌细胞缺氧缺糖/复氧复糖损伤,随浓度升高该效应减弱。